Après des débuts à la télévision dès la fin des années 50, Míriam Colón joua dans plusieurs longs métrages américains des années 60. Première Portoricaine membre de l'Actors Studio, elle donna notamment la réplique à Marlon Brando dans les westerns La Vengeance aux deux visages (1961) puis L'Homme de la sierra (1966).

Elle figura également au générique de la série soap On ne vit qu'une fois, et jouera le rôle qui la fera le plus connaître : celui de "Mama" Montana, la mère du gangster Tony Montana du film Scarface. Elle n'avait alors que 4 ans de plus qu'Al Pacino.

Colón fonda notamment le Puerto Rican Traveling Theater, qui permit de faire émerger la scène hispanique et portoricaine à New York.