Née à Bristol d'une mère coiffeuse et d'un père gestionnaire de portefeuilles, Tuppence Middleton fait ses classes à la Bristol Grammar School. Refusant de poursuivre son apprentissage sur les bancs de l'université, comme le lui conseillent ses parents, elle part étudier le jeu d'acteur à l'école d'art dramatique The Arts Educational Schools de Chiswick à Londres.
Tout juste diplômée, elle décroche dans la foulée son premier rôle au cinéma dans la comédie d'horreur Tormented (2009). L'année suivante, elle fait partie de la Chatroom du Japonais Hideo Nakata, un thriller 2.0 porté par Aaron Taylor-Johnson. L'actrice britannique obtient également le rôle de Kate, la petite amie de Ash (Abhin Galeya), un étudiant ordinaire qui bascule dans le terrorisme dans le direct to dvd Menace d'Etat avec Sean Bean en tête d'affiche.
Le petit écran aussi repère cette actrice au teint d'albâtre et aux pupilles à colométrie variable. Elle figure ainsi dans deux épisodes de Bones et de Friday Night Dinner, décroche un rôle régulier dans Sinbad ainsi que dans la mini-série Espions de Varsovie.
Puis, un réalisateur britannique de renom, Danny Boyle, l'engage pour le thriller hypnotique Trance (2013), où elle campe une jeune femme insouciante. Elle tient la même année le premier rôle d'une amnésique en convalescence dans Trap for Cinderella. A l'été 2014, l'actrice de 27 ans est à l'affiche du très attendu film de science-fiction Jupiter Ascending des Wachowski et de la comédie Duo d'escrocs avec Pierce Brosnan et Emma Thompson.
Marie Ponchel