Fils du politicien Gaetano Gifuni, Fabrizio Gifuni suit sa formation de comédien à l’Académie Nationale d'art dramatique Silvio D’Amico. Après des débuts prometteurs sur les planches, il est repéré en 1993 par le réalisateur Giuseppe Ferrara, qui lui confie son premier rôle au cinéma, dans un biopic consacré au juge Giovanni Falcone. Ne renonçant pas au théâtre pour autant, Gifuni multiplie les apparitions au cinéma et à la télévision. Entre 1996 et 2000, il enchaîne les succès avec Le Laideron, Mon frère (Lion d'or à la Mostra de Venise 1998) et surtout Un Amour, délicieuse comédie romantico-dramatique signée Gianluca Maria Tavarelli, qui lui permet d’être nommé au prix David di Donatello. En 2001, alors que le tournage d’Hannibal (suite du Silence des Agneaux) s’installe en Italie, il décroche le rôle de Matteo, une des futures victimes du tueur ...
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